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生物制品-培养基生产环境如何提高灭菌效率

更新时间:2023-10-11   点击次数:348次

培养基一个医药产业极为重要和广泛的生产物资,是一些生物药品的生产、实验室运行的基础性物资,细胞培养、微生物培养都要用到培养基。

微生物培养基的定义

培养基是指使用手动方法生产的混合营养产品,用于微生物培养、分离、鉴定、研究和保存。微生物的生长繁殖需要一定的营养物质和适宜的环境条件。在人类开发、生产和疾病防治过程中,为了控制和利用微生物,对天然或纯化的营养物质和适宜的渗透压、pH值等进行加工,生产出不同营养需求的营养基质,在人工条件下培养和使用微生物。这类人工培养的微生物(细菌、真菌、病毒等)具有多种用于各种目的的营养制剂,如微生物生长、繁殖或分离鉴定等,俗称微生物培养基。研究培养基成分、制备方法、储存条件、培养原理、质量控制和影响评估、原材料生产和应用等一系列主题的科学被称为培养基科学。

微生物培养基分类

微生物培养基按培养基成分可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类;按物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基;按微生物的种类分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基;按特殊用途分为基础培养基、加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。

培养基灭菌大多数用湿热灭菌。

讲解一下微生物培养基的灭菌方法:

1.干热灭菌法(即热空气灭菌法)

干热灭菌一般是利用电热烘箱作为干热灭菌器。前面所包装好的玻璃器皿,如带棉塞的三角瓶、试管、包装好的吸管、培养皿等,放入电热烘箱中。打开烘箱顶部的通气孔,接上电源加热,使箱内空气的温度达到160℃-170℃,关闭通气孔使箱内的温度保持在160℃左右并维持1.5-2h。时间一到,切断电源;待温度下降60℃-70℃以下,方可打开箱门取灭菌物品,否则骤冷后易使箱内玻璃仪器破损。

2. 加压蒸汽灭菌法

利用高压灭菌器,使水的沸点在密闭的灭菌器内随压力升高而增高,来提高蒸汽的温度和灭菌的效率。在同一温度下湿热的杀菌效率比干热大,因为微生物细胞蛋白质在湿热情况下,易干凝固,同时湿热的穿透力强,当水蒸气与被灭菌的物品相接触后,便放出汽化潜热,逐步提高被灭菌物品的温度,直至与水蒸汽的温度相等,达到平衡为止,从而提高灭菌效率。

3.湿热灭菌

灭菌原理是直接用蒸汽灭菌,蒸汽在冷凝时能释放出大量潜热,蒸汽具有强大的穿透力,破坏菌体蛋白和核酸的化学键,使酶失活,微生物因代谢障碍而死亡。水煮常压灭菌:100℃。或饱和蒸汽灭菌:一般121℃,30分钟。适合培养基和发酵设备灭菌。尤其是对芽孢、霉菌等高抗性微生物的控制——湿热灭菌也不能保障100%的灭菌成功,灭菌后有可能还会存在芽孢等高抗性微生物的存留,容易导致内毒素污染。

3.紫外线灭菌

波长260-280nm之间的紫外线有很强的杀菌能力,一般紫外灯管能产生253.7nm的紫外光,杀死力强而稳定,但穿透力弱一般只适宜物体表面、空气灭菌。例如接种室、培养室、手术室、药厂包装室等空气灭菌。一般30w灯管、9m3空间,距地面2m每次打开紫外线照射0.5h,就使室内空气灭菌。若照射紫外线时,先喷洒石碳酸等化学消毒剂,可增强灭菌效果。

在进行微生物接种和分离等操作时,常须用紫外线来杀灭接种室(箱)空气、台面等处的微生物。

紫外线虽有较强的杀菌力,但穿透力较弱,即使一薄层玻璃或水层就能将大部分紫外线滤除,因此只适用于空气及表面杀菌。紫外线对眼粘膜及视神经有强烈的损伤作用,对皮肤有刺激作用,所以不能直接在紫外线灯开启下工作和用眼睛直视开启的紫外灯。

4. 化学药剂消毒灭菌

微生物实验室中常用的化学杀菌剂有甲醛、高锰酸钾、酒精、碘酒、龙胆紫、石炭酸、新洁尔灭、煤酚皂溶液,它们有的是杀菌剂,有的是抑菌剂,

以上是微生物培养基的灭菌方法说明,如果你的培养基中所有的成分都可以耐高温,那就用压力蒸汽高温灭菌的方式;如果你的培养基中有些成分不耐高温,就可以用除菌过滤的方式除菌,用除菌滤器过滤培养基至已灭菌的培养器中。如果要求不高,部分试验用培养基,可以用煮沸的方式灭菌。

特别是在发酵过程中,培养基灭菌主要有以下几个原因:如不灭菌,会使生物反应的基质或产物,因杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降;杂菌也会产生代谢产物,这就使产物的提取更加困难,造成得率降低,产品质量下降;杂菌大量繁殖后,会改变反应液的pH值,使反应异常;有些杂菌会分解产物,使生产失败;如果发生噬菌体污染,生产菌细胞将被裂解,使生产失败。如果企业考虑杀菌效率,安全性,腐蚀性,残留性,耐药性,可以了解一下奥克泰士,奥克泰士专业解决高抗微生物问题,提供科学的微生物控制方案和标准操作流程。我们倡导生态环保消毒理念,无色无味无毒无残留,拥有德国前沿的微生物控制技术,技术力量雄厚。