关键词：制药、洁净区霉菌污染、杀霉菌消毒剂、洁净区浮游菌沉降菌控制与霉菌污染分析、GMP车间消毒剂、进口杀孢子剂、实验室微生物、物表、洁净室轮替消毒灭菌、杀芽孢剂、去除管道生物膜、纯化水系统、不可接受微生物、BCC、洋葱伯克霍尔德菌、皮氏罗尔斯顿菌。

一、引言

在生物制药领域，洁净区和实验室的环境质量直接关系到药品的质量和安全性。霉菌作为一种常见的微生物污染源，其存在可能对药品生产过程和最终产品造成严重影响。霉菌不仅会污染产品，还可能产生有害的代谢产物，威胁患者的健康。因此，深入探讨药企环境中霉菌的评估、控制以及相应的消毒解决方案具有重要的现实意义。

二、药企环境中发现霉菌如何评估产品

（一）霉菌污染对产品的影响

霉菌污染药品后，可能导致药品的物理、化学和生物学性质发生改变。例如，霉菌的生长可能会改变药品的外观，使其出现变色、斑点或异味；霉菌产生的酶类物质可能分解药品中的有效成分，降低药品的疗效；某些霉菌还会产生毒素，如黄曲霉毒素等，这些毒素具有强烈的致癌、致畸和致突变作用，严重危害患者的健康。

（二）评估产品的方法

1. 微生物限度检查

   ：按照药典规定的方法，对药品进行微生物限度检查。通过培养基培养，检测药品中霉菌的数量，判断是否符合规定的标准。如果霉菌数量超标，则说明产品可能受到霉菌污染。

2. 化学分析

   ：采用化学分析方法，检测药品中是否含有霉菌产生的代谢产物，如有机酸、酶类等。这些代谢产物的存在可能表明药品已经受到霉菌污染。

3. 稳定性研究

   ：对受霉菌污染的药品进行稳定性研究，观察其在不同储存条件下的质量变化情况。通过比较污染前后药品的稳定性数据，评估霉菌污染对药品质量的影响程度。

（二）洁净区环境霉菌污染评估流程

1. 确定污染范围

   ：首先，通过调查和检测，确定霉菌污染的具体范围，包括受污染的区域、设备、物料等。了解霉菌污染的传播途径和可能影响的产品批次。

2. 评估产品暴露程度

   ：分析受污染区域的产品生产情况，确定哪些产品可能暴露在霉菌污染环境中。考虑产品的生产工艺、生产时间、包装形式等因素，评估产品受到霉菌污染的可能性。

3. 微生物检测

   ：对可能受污染的产品进行微生物检测，包括霉菌和细菌的检测。采用合适的检测方法，如直接接种法、薄膜过滤法等，检测产品中的微生物数量和种类。

4. 产品质量评估

   ：结合微生物检测结果、产品的质量标准和稳定性研究数据，评估霉菌污染对产品质量的影响。如果检测结果显示产品中霉菌数量超过标准限度，或者霉菌产生的代谢产物可能影响产品的安全性和有效性，应判定产品不合格。

5. 风险评估

   ：除了微生物检测外，还应进行风险评估，考虑霉菌污染可能带来的潜在风险。例如，对于注射剂等无菌制剂，即使微生物检测结果未超标，但由于霉菌污染可能导致严重的感染风险，也应谨慎评估产品的安全性。

（三）评估结果的处理

根据评估结果，如果产品被判定为受到霉菌污染且不符合质量标准，应立即采取措施进行处理。对于尚未出厂的产品，应进行隔离、销毁或返工处理；对于已经出厂的产品，应启动召回程序，确保患者的用药安全。同时，应对污染原因进行深入调查，采取有效的预防措施，避免类似事件再次发生。

三、制药洁净区允许霉菌存在吗？

洁净区通常不允许霉菌存在。根据GMP（药品生产质量管理规范）的要求，洁净区的微生物负荷必须控制在可接受的范围内，以防止污染药品和影响产品质量。以下是洁净区不允许霉菌存在的几个关键原因：

1. 微生物污染：霉菌的存在可能意味着环境控制失效，可能导致微生物污染，影响产品质量和生产环境的稳定性。

2. 产品质量影响：即使是非无菌生产的药品，一旦受到霉菌污染，可能会影响药品的有效性、稳定性甚至安全性。

3. 生产环境稳定性：霉菌的生长如果不加以控制，可能会逐渐扩散，影响整个洁净区的微生态环境，进而干扰生产设备的正常运行，增加设备的维护成本。

尤其是对于无菌药品的生产区域。因为霉菌具有较强的生存能力和繁殖能力，一旦在洁净区内滋生，很难清除，会对药品生产造成严重的威胁。

（一）洁净区的定义和要求

洁净区是指需要对尘粒及微生物数量进行控制的房间（区域），其建筑结构、装备及其使用应当能够减少该区域内污染物的引入、产生和滞留。在生物制药行业中，洁净区通常分为不同的级别，如a、B级、C级和D级，不同级别的洁净区对微生物数量的控制要求不同。

（二）霉菌在洁净区的存在情况

从理论上讲，洁净区应该严格控制微生物的数量，包括霉菌。然而，在实际生产过程中，由于各种因素的影响，如人员操作、物料传递、设备维护等，洁净区很难避免霉菌的存在。但洁净区的霉菌数量必须控制在规定的范围内，以确保药品生产过程的质量和安全性。

（三）相关法规和标准的要求

各国药典和相关法规都对洁净区的微生物控制提出了明确的要求。《中国药典》根据洁净区的不同级别，对霉菌和酵母菌总数设定了严格的标准。如果洁净区的霉菌数量超过标准，将被视为不符合生产要求，需要采取措施进行整改。

例如：非无菌产品霉菌限值要求

对于非无菌产品，《中国药典》规定霉菌限值为≤100 CFU/g 。以 D 级洁净区为例，虽属于 “非无菌环境"，但霉菌污染风险绝不容忽视。霉菌的孢子具有耐干燥、易扩散的特性，当环境湿度＞65% 时，更是会快速繁殖。行业调查数据显示，D 级洁净区的霉菌污染事件中，高达 60% 是由湿度失控引发。某药企检测发现，潮湿墙面的霉菌密度竟高达 10³ CFU/cm² ，远远超出了行业所能容忍的阈值范围。

‌2025年版《中国药典》对洁净区限值的具体要求如下‌：

1. ‌浮游菌限值‌：浮游菌的限值为每立方米空气中≤500菌落形成单位（CFU）。
2. ‌沉降菌限值‌：沉降菌的限值为每个90毫米培养皿中≤10CFU。
3. ‌不可接受微生物‌：对于一些致病菌如铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等，不得检出‌。

此外，2025年版《中国药典》还对中药材及中药饮片的微生物限度进行了更严格的修订，具体包括：

• ‌霉菌和酵母菌数‌：对于口服固体制剂用的中药材原料，霉菌和酵母菌数不得超过1000个/克‌。
• ‌致病菌检测‌：对于直接外用的中药饮片，特定致病菌如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等不得检出‌3。

这些修订旨在进一步提升药品生产的质量标准，确保药品的安全性。

四、洁净区浮游菌沉降菌控制与霉菌污染分析

在 GMP车间的微生物监测中，浮游菌和沉降菌是重要的监测指标。当空气中检出沉降菌中有霉菌时，需要及时进行分析和处理。

（一）监测方法

1. 浮游菌监测：采用浮游菌采样器，在洁净区内不同位置、不同高度进行空气采样。将采集到的空气样品接种到培养基上，在适宜条件下培养，然后对生长的菌落进行计数和鉴定。

1. 沉降菌监测：将装有培养基的培养皿暴露在洁净区空气中，静置一定时间后，盖上培养皿盖，在适宜条件下培养。培养结束后，对培养皿上生长的菌落进行计数和鉴定。

（二）霉菌污染分析

当空气中检出沉降菌中有霉菌时，首先要确定霉菌的种类和来源。通过对霉菌的形态学特征、生理生化特性等进行分析，判断其可能的污染途径。例如，如果检出的霉菌为曲霉属，可能与车间的通风不良、灰尘较多有关；如果是青霉属，可能与物料储存环境潮湿有关。

同时，要结合浮游菌监测数据，综合评估霉菌污染的程度。如果浮游菌和沉降菌的霉菌检出率均较高，说明车间的空气环境受到了严重污染，需要立即采取措施进行处理。

五、制药洁净区霉菌控制-日常和定期消毒

（一）日常消毒

1. 消毒频率

   ：根据洁净区的级别和生产工艺的要求，制定合理的日常消毒频率。一般来说，洁净区应每天进行消毒，B级洁净区可每2 - 3天进行一次消毒，C级和D级洁净区可根据实际情况每周进行1 - 2次消毒。

2. 消毒方法

   ：常用的日常消毒方法包括擦拭消毒、喷雾消毒等。擦拭消毒适用于设备和物表的消毒，可使用含有有效消毒成分的湿巾或抹布进行擦拭。喷雾消毒适用于空气和较大面积的物表消毒，可使用喷雾器将消毒剂均匀地喷洒在消毒对象上。

3. 消毒剂选择

   ：日常消毒应选择对霉菌有较好杀灭效果且对人员和环境无害的消毒剂。例如，75%的乙醇、含氯消毒剂等都可以用于日常消毒。但需要注意的是，这些消毒剂可能存在一定的局限性，如对某些高抗性的霉菌芽孢和生物膜的杀灭效果不佳。

（二）定期消毒

1. 消毒目的

   ：定期消毒的主要目的是预防霉菌芽孢、生物膜等高抗微生物的产生和传播。这些高抗微生物具有较强的抵抗力，常规的消毒方法可能难以将其杀灭。

2. 消毒周期

   ：定期消毒的周期应根据洁净区的实际情况和生产工艺的要求进行确定。一般来说，可每月或每季度进行一次全面的定期消毒。

3. 消毒方法

   ：定期消毒通常采用杀孢子剂进行消毒。杀孢子剂是一种能够杀灭细菌芽孢、霉菌孢子等高抗微生物的消毒剂。常用的杀孢子剂包括过氧化氢银离子复合型杀孢子剂奥克泰士等。

（三）洁净区空气沉降霉菌孢子控制

1. 空气净化系统的作用

   ：空气净化系统是控制洁净区空气沉降菌和霉菌孢子的重要手段。通过高效空气过滤器，可以有效地过滤空气中的微生物，降低空气中的霉菌孢子含量。

2. 空气监测

   ：定期对洁净区的空气进行监测，检测空气中的沉降菌和霉菌孢子数量。根据监测结果，及时调整空气净化系统的运行参数，确保空气质量符合要求。

3. 空气消毒

   ：除了依靠空气净化系统外，还可以采用空气消毒设备对洁净区的空气进行消毒。例如，紫外线灯、臭氧发生器等都可以用于空气消毒。但需要注意的是，这些空气消毒设备在使用过程中可能会存在一定的安全隐患，应严格按照操作规程进行使用。

（四）设备表面微生物控制

1. 设备清洁

   ：在每次生产结束后，应及时对设备进行清洁，去除设备表面的污垢和残留物。清洁方法应根据设备的材质和特点进行选择，避免对设备造成损坏。

2. 设备消毒

   ：定期对设备表面进行消毒，杀灭设备表面的霉菌和微生物。消毒方法可选择擦拭消毒或喷雾消毒，使用的消毒剂应具有较好的杀灭霉菌效果。

3. 设备维护

   ：加强对设备的维护和保养，及时更换损坏的部件，确保设备的密封性和正常运行。定期对设备的管道进行清洗和消毒，防止管道内滋生霉菌。
   
   

六、洁净区霉菌控制-杀孢子剂的挑选原则

在霉菌污染防控中，杀孢子剂是一种重要的消毒工具。然而，并非所有的消毒剂都能有效杀灭霉菌孢子。因此，如何挑选合适的洁净区杀孢子剂至关重要。

（一）杀菌能力

杀孢子剂必须具备强大的杀菌能力，能够有效杀灭霉菌及其孢子。在选择时，可以参考消毒剂的杀菌试验报告，了解其对不同种类霉菌孢子的杀灭效果。同时，要注意消毒剂的作用时间和使用浓度，确保在实际应用中能够达到理想的杀菌效果。

（二）安全性

由于杀孢子剂会应用于制药车间的洁净区，因此其安全性至关重要。选择的杀孢子剂应无毒、无味、无残留，对人体无害，不会对药品质量产生影响。此外，还要考虑消毒剂对设备和材料的腐蚀性，避免对生产设备造成损坏。

（三）材料兼容性

杀孢子剂应与洁净区内的各种设备、材料具有良好的兼容性。在使用前，需要进行材料兼容性测试，确保消毒剂不会与设备表面的材料发生化学反应，导致设备损坏或产生污染物。

（四）使用方便性

选择使用方便的杀孢子剂，可以提高工作效率，降低劳动强度。例如，一些杀孢子剂可以直接喷洒或擦拭，操作简单快捷；而一些需要稀释或特殊处理的消毒剂，则可能会增加使用难度和时间成本。

（五）轮替使用

为了防止霉菌对杀孢子剂产生耐药性，建议采用轮替消毒的方式。选择不同作用机制的杀孢子剂进行交替使用，能够更全面地杀灭霉菌及其孢子，提高消毒效果。

七、奥克泰士 —— 洁净区杀孢子剂解决方案

奥克泰士是一款德国进口的杀孢子剂，在制药 GMP 车间和实验室的霉菌污染防控中表现优秀，为企业提供了完整的微生物污染解决方案。

（一）产品特性

（二）多用途应用

（三）应用场景